• Biophotonique et ondes
  • Cellule unique / molécule unique

Imagerie dynamique, volumétrique et à super-résolution de l’organisation cellulaire et de l’orientation moléculaire avec la technologie de cryo-arrêt réversible

Projet mené par  Bassam Hajj,  Guillaume Orsi
R

Résumé

L’organisation moléculaire joue un rôle crucial dans l’orchestration des fonctions cellulaires. Cependant, l’observation de cette organisation au niveau de la molécule unique, dans un environnement encombré tel que le noyau cellulaire, et à des instants précis, demeure un grand défi.

Ce projet vise à développer une microscopie super-résolution unique en combinant : (i) l’excitation sélective des plans de l’échantillon et (ii) l’imagerie volumétrique à l’aide de la microscopie multifocus, pour de l’imagerie dense à l’échelle de la molécule unique. De plus, l’orientation 3D d’une seule molécule sera accessible par analyse de polarisation et permettra une meilleure discrimination de l’organisation locale et des molécules voisines. Une technologie d’interruption de l’activité cellulaire par le froid (cryo-arrêt) réversible sera mise en œuvre pour geler le mouvement moléculaire dans la cellule et pour obtenir une stabilité photo-physique à basse température.

Nous utiliserons cette technologie pour évaluer la structure et la dynamique in vivo de l’ADN, des nucléosomes et de l’ARN polymérase au niveau de gènes actifs (en transcription) avec une résolution sans précédent, dans la même cellule et à des temps donnés consécutifs.

A

Appel

En réponse à : Appel à projets 2018 : Technologies innovantes

Développement et dissémination de technologies innovantes pour la recherche en Sciences de la Vie

Détails et projets soutenus
E

Equipes

  • Unité Dynamique du noyau

    CNRS - French National Centre for Scientific Research
    Curie Institute
    Sorbonne University

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  • Imagerie et contrôle de l’organisation cellulaire (LOCCO)

    CNRS - French National Centre for Scientific Research
    Curie Institute
    Pierre Gilles de Gennes Institute
    Sorbonne University

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